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Q1.なぜ280 nmの吸光度を測定するとタンパク質濃度がわかるんでしょうか…|極2 めざせタンパク質定量と染色の達人|めざせ 実験の達人|実験医学online:羊土社 - 羊土社
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Q1.なぜ280 nmの吸光度を測定するとタンパク質濃度がわかるんでしょうか…|極2 めざせタンパク質定量と染色の達人|めざせ 実験の達人|実験医学online:羊土社 - 羊土社
A.タンパク質が光を吸収する性質を理解しよう 一般にタンパク質溶液は,ペプチド結合に由来する紫外吸... A.タンパク質が光を吸収する性質を理解しよう 一般にタンパク質溶液は,ペプチド結合に由来する紫外吸収ピーク(200〜215 nm付近)と,芳香族アミノ酸(チロシン,トリプトファン)の側鎖に由来する280 nmの吸収ピークを示す.このうち,200〜215 nm付近のピークは他の溶媒成分などの吸収波長と重なるため,このピークを用いたタンパク質濃度の測定方法は実用的ではない.しかし280 nmの吸収は他の成分との波長の重なりが少ないため,この280 nmにおける吸光度をタンパク質の定量に用いることが出来る. タンパク質によってチロシンやトリプトファンの含量が異なるため,タンパク質間で値は変化するが,さまざまなタンパク質を含んだ粗タンパク質溶液の場合,280 nmにおける吸光度(1 cmの光路長セルを用いた場合)が1のとき,その溶液のタンパク質濃度は概ね約1 mg/mL程度となる.実際に,対象タン