DNA分析操作 プロトコル
DNA works protocol Table of contents DNA isolation 1.1 CHAOS methods 1.2 DNA isolation <SDS-Proteinase K method) 1.3 CTAB methods PCR 2.1 PCR amplification of small subunit ribosomal RNA precipitation 3.1Pulyfication of PCR products by ethanol precipitation 3.2Pulyfication of PCR products by PEG precipitation RFLP 4.1 restriction enzyme / introduction 4.2 Make of DNA molecular maker (
ボイリング法
リゾチーム溶液 10mg/ml リゾチーム in TE 前日の実験操作 試験管などに、3mlの、適当な抗生物質を加えたLB培地を分注する トランスフォームを行って得られたシングルコロニーを滅菌した爪楊枝で拾い上げる 試験管内の培地に植菌する この前にマスタープレートを作っておくことを勧める 37℃で一晩振盪培養する 当日の操作 培養物各1.5mlをエッペンドルフチューブに分注する 5000回転で5分間室温で遠心して大腸菌を集め、上清をほぼ完全に除去する 全てのサンプルに対して菌体回収をまず行う この時点で沸騰したお湯（または100℃のブロックヒーター）を作っておく 引き続いて行うリゾチーム処理・煮沸の操作は、一度に８本まで エッペンドルフチューブ内の菌体ペレットを400μlのSTETに懸濁する このときの懸濁はピペッティングによって行い懸濁後は氷中に沈める 菌体懸濁液にリゾチーム溶液を40
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