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DNAのPCR(dinop.com)
【反応溶液】 DNA sample 1.0μl 100pM primer 1.0μl×2 2.5mM dNTP 5.0μl ×10 Buffer(MgCl2入) 5.0μl H... 【反応溶液】 DNA sample 1.0μl 100pM primer 1.0μl×2 2.5mM dNTP 5.0μl ×10 Buffer(MgCl2入) 5.0μl H2O total 50μl ※ H2Oはオートクレーブ済みの滅菌水を用いる。 ※ BufferにMgCl2が含まれていない場合には終濃度1.5mMになるように加える ※ ミネラルオイル50μlを上に入れ反応中に蒸発しないようにする ※ Taq polymeraseは反応開始後に0.5μl入れる(下記参照) 【反応溶液 6回分】 DNA sample 6.0μl 100μM primer 1.5μl×2 2.5mM dNTP 30μl ×10 Buffer(MgCl2入) 30μl H2O total 300μl(231μl) ※ primerとなる合成オリゴDNAは100μMでストックすることが多いためこの調製法が便